培養(yǎng)基制造和滅菌的辦法以及步驟

<p>微生物培育基是供微生物成長(zhǎng)、繁衍、代謝的混合養(yǎng)料。因?yàn)槲⑸锞哂胁煌酿B(yǎng)分類型，對(duì)養(yǎng)分物質(zhì)的要求也各不相同，加之研究的意圖不同，所以培育基的種類許多，運(yùn)用的質(zhì)料也各有差異，但從養(yǎng)分視點(diǎn)剖析，微生物培育基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、成長(zhǎng)素以及水分等。別的，培育基還應(yīng)具有適合的pH值、必定的緩沖才能、必定的氧化還原電位及適宜的滲透壓。為了到達(dá)特定要求的研究，需求進(jìn)行培育基制造和滅菌，那么微生物培育基該怎么制造與滅菌呢?<br /> 1.調(diào)理pH值<br /> 用pH試紙(或pH電位計(jì)、氫離子濃度比色計(jì))測(cè)驗(yàn)培育基的pH值,如不契合需求,可用10%HCl或10%NaOH進(jìn)行調(diào)理,直到調(diào)理到配方要求的pH值停止。<br /> 2.分裝<br /> 已過(guò)濾的培育基應(yīng)進(jìn)行分裝.如果要制造斜面培育基,須將培育基分裝于試管中.如果要制造平板培育基或液體、半固體培育基,則須將培育基分裝于錐形瓶?jī)?nèi)。<br /> 3.過(guò)濾<br /> 用濾紙、紗布或棉花趁熱將已配好的培育基過(guò)濾.用紗布過(guò)濾時(shí),最好折疊成六層,用濾紙過(guò)濾時(shí),可將濾紙折疊成瓦棱形,鋪在漏斗上過(guò)濾。<br /> 4.制造溶液<br /> 向容器內(nèi)參加所需水量的一部分,按照培育基的配方,稱取各種質(zhì)料,順次參加使其溶解,最終補(bǔ)足所需水分，對(duì)蛋白胨、肉膏等物質(zhì),需加熱溶解,加熱進(jìn)程所蒸騰的水分,應(yīng)在悉數(shù)質(zhì)料溶解后加水補(bǔ)足?！?lt;br /> 制造固體培育基時(shí),先將上述已配好的液體培育基煮沸,再將稱好的瓊脂參加,持續(xù)加熱至徹底消融.并不斷攪拌,防止瓊脂糊底燒焦。<br /> 分裝時(shí),一手捏松繃簧夾,使培育基流出,另一只手抓住幾支試管或錐形瓶,順次接取培育基。分裝時(shí),注意不要使培育基粘附管口或瓶口,防止浸濕棉塞引起雜菌污染。<br /> 裝入試管的培育基量,視試管和錐形瓶的巨細(xì)及需求而定.一般制造斜面培育基時(shí),每只15&times;150毫米的試管,約裝3～4毫升(1/4～1/3試管高度),如制造深層培育基,每只20&times;220毫米的試管約裝12～15毫升。每只錐形瓶裝入的培育基,一般以其容積的一半為宜。<br /> 5.制造斜面培育基和平板培育基<br /> 培育基滅菌后,如制造斜面培育基和平板培育基,須趁培育基未凝結(jié)時(shí)進(jìn)行。<br /> (1)制造斜面培育基。在試驗(yàn)臺(tái)上放1支長(zhǎng)0.5～1米左右的木條,厚度為1厘米左右，將試管頭部枕在木條上,使管內(nèi)培育基天然歪斜,凝結(jié)后即成斜面培育基。<br /> (2)制造平板培育基。將剛剛滅過(guò)菌的盛有培育基的錐形瓶和培育皿放在試驗(yàn)臺(tái)上,點(diǎn)燃酒精燈,右手托起錐形瓶瓶底,左手拔下棉塞,將瓶口在酒精燈上稍加灼燒,左手翻開(kāi)培育皿蓋,右手敏捷將培育基倒入培育皿中,每皿約倒入10毫升,以鋪滿皿底為度.鋪放培育基后放置15分鐘左右,待培育基凝結(jié)后,再5個(gè)培育皿一疊,倒置過(guò)來(lái),平放在恒溫箱里,24小時(shí)后查看,如培育基末長(zhǎng)雜菌，即可用來(lái)培育微生物。<br /> 5.加棉塞<br /> 分裝結(jié)束后,需求用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的首要意圖是過(guò)濾空氣,防止污染.棉塞應(yīng)選用普通新鮮、干燥的棉花制造,不要用脫脂棉,防止因脫脂棉吸水使棉塞無(wú)法運(yùn)用。制造棉塞時(shí),要根據(jù)棉塞巨細(xì)將棉花鋪展成恰當(dāng)厚度,揪取手掌心巨細(xì)一塊,鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,用右手食指插入棉花中部,一起左手食指與姆指稍稍緊握,就會(huì)形成1個(gè)長(zhǎng)棒形的棉塞.棉塞作成后,應(yīng)敏捷塞入管口或瓶口中,棉塞應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙,以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過(guò)緊過(guò)松,塞好后,以手提棉塞、管、瓶不下落為適宜。棉塞的2/3應(yīng)在管內(nèi)或瓶?jī)?nèi),上端露出少量棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上厚紙用繩捆札,準(zhǔn)備滅菌。<br /> &nbsp;</p>